Hoʻokahi ʻanuʻu RT-qPCR SYBR Green Premix
Helu popoki: HCB5140A
Hoʻokahi ʻanuʻu RT-qPCR Syber Green Premix no ka helu ʻana i ka fluorescence e pili ana i ka SYBR Green I dye.Me ka hoʻohana ʻana i nā kumu mua kikoʻī gene, hoʻopau ʻia ka transcription a me qPCR reactions i loko o ka paipu hoʻokahi, e hoʻopau ana i ka pono no ka wehe pinepine ʻana i ka pāpale a me nā hana pipetting, e hoʻomaikaʻi nui ana i ka hana assay a me ka hōʻemi ʻana i ka pilikia o ka haumia.No nā laʻana RNA, hoʻohana ka kit Reverse Transcriptase pale wela no ka synthesis cDNA kūpono a me HotStart Taq DNA Polymerase no ka hoʻonui nui ʻana.Ma lalo o ka optimized buffer system, hiki i ka sensitivity o ka kit ke kiʻekiʻe e like me 0.1 pg no nā pahuhopu i hōʻike nui ʻia a hiki i ka 1 pg no nā pahuhopu haʻahaʻa haʻahaʻa.He kūpono ke kit no ka hoʻonui a me ka helu ʻana i nā laʻana DNA.Hiki iā ia ke ʻike a me ka helu ʻana i nā waikawa nucleic mai nā mea kanu a me nā holoholona like ʻole, nā cell a me nā microorganism.
Nā ʻāpana
| No | inoa | Volume | Volume |
| 1 | Hoʻopaʻa kiʻekiʻe | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 2 | Hui Enzyme Kiekie | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
Nā Kūlana Waihona
Pono e mālama ʻia kēia huahana ma -25 ~ -15 ℃ mai ka mālamalama no 1 makahiki.
Nā kuhikuhi
1.Reaction system hoʻonohonohod
| Nā ʻāpana | Volume (μL) | Volume (μL) | Hoʻoholo hope |
| Hoʻopaʻa kiʻekiʻe | 12.5 | 25 | 1× |
| Hui Enzyme Kiekie | 1 | 2 | - |
| ʻAno mua (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Pumi Hoʻohuli (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | i ka 25 | i 50 | - |
Nā memo:
1) a.TʻO ka helu kumu mua he 0.2 μmol/L, hiki ke hoʻololi ʻia ma waena o 0.1 a me 1μmol/L e like me ke kūpono.
2) b.He koʻikoʻi loa ka reagent, me ka Total RNA ma ka laulā o 1pg-1μg, a me ka hoʻāʻo ʻana i nā laʻana kanaka i hōʻike i kahi hoʻokomo maikaʻi loa o 1 pg-100 ng, e hoʻomalu ana i kahi waiwai Ct holoʻokoʻa ma ka laulā o 15-30 e like me ke kūpono.
3) c.Manaʻo ʻia e hoʻohana i ka 20μL a i ʻole 50μL e hōʻoia i ka pono a me ka reproducibility o ka hoʻonui ʻia ʻana o ka gene.
4) d.E ʻoluʻolu e hoʻomākaukau i loko o ka papa hoʻomaʻemaʻe ultra-maʻemaʻe a hoʻohana i nā ʻōlelo aʻoaʻo ʻole koena nuclease a me nā paipu pane;paipai ʻia nā ʻōlelo aʻoaʻo me nā pahu kānana.Hōʻalo i ka hoʻohaumia kea a me ka hoʻohaumia aerosol.
2.Papahana pane
| Kaʻina kaʻapuni | Temp. | Manawa | Nā pōʻaiapuni |
| Hoʻihoʻi i ka palapala | 50 ℃a | 6 min | 1 |
| Denaturation mua | 95 ℃ | 5 min | 1 |
| Pane hoʻonui | 95 ℃ | 15 sec | 40 |
| 60 ℃b | 30 sec | ||
| Heʻe ʻanuʻu pōʻaiapuni | Mea Paʻamau | 1 | |
Nā memo:
1) a.Hiki ke koho ʻia ka mahana transcription hope ma waena o 50-55°C e like me nā pono hoʻokolohua.No nā laʻana DNA, hiki ke kāpae ʻia ke kaʻina hana unuhi.
2) b.Ma nā hihia kūikawā hiki ke hoʻololi ʻia ka mahana annealing/extension e like me ke kumu waiwai Tm, 60 ° C.
Nā memo
1. No ka noiʻi wale nō kēia huahana.
2. E ʻoluʻolu e hana me nā ʻaʻahu lab a me nā mīkina lima hoʻopau, no kou palekana.
