Multiplex Hoʻokahi ʻanuʻu RT-qPCR Premix
wehewehe
Helu popoki: HCR5141A
ʻO ka Multiplex One Step RT-qPCR Premix kahi pahu PCR nui nui e pili ana i ka RNA ma ke ʻano hoʻohālike.I loko o ka hoʻokolohua, hana ʻia ka hoʻololi ʻana a me ka PCR quantitative i loko o ka paipu hopena like, e hoʻomaʻamaʻa i ka hana hoʻokolohua a hōʻemi i ka hopena o ka hoʻohaumia ʻana.Hiki ke hoʻohana ʻia ka hoʻolālā kūʻokoʻa o ka buffer a me ka hui enzyme i ka ʻōnaehana lyophilized hoʻokahi.Hoʻohana ka pahu i ka Reverse Transcriptase pale wela no ka hoʻopili pono ʻana o ka cDNA strand mua me ka hoʻohana ʻana i ka hotstart Taq DNA Polymerase no ka hoʻonui nui ʻana.Loaʻa iā ia ka mea hoʻopaʻa hopena maikaʻi loa, hui pū ʻia nā enzymes a me nā mea e pale pono ai i ka hoʻonui ʻana i ka PCR non-specific a me ka hoʻonui ʻana i ka hoʻonui ʻana o nā hopena qPCR he nui i hoʻohui ʻia, e hiki ai i ka nui o ka fluorescence quantitative amplification me ka hōʻoia ʻana i ka pono amplification o nā primers.
Nā ʻāpana
inoa |
1. Lyo-Buffer |
2. Lyo-Enzyme Mix |
3. Lyo pale |
Kūlana kaʻaheleion
A: ʻO Lyo-buffer a me ka pale: -25 ~ -15 ℃, ʻo 1 makahiki ke ola o ka mālama.
B: ʻO Lyo-enzyme hui, 2-8 ℃, he 6 mahina ke ola.
Aʻo no ka hana
1. Pūnaehana Reaction (E lawe i ka 25μL i laʻana)
Nā ʻāpana | Volume (μL) | Hoʻopaʻa hope |
Lyo-Buffer | 6 | 1* |
Huihui Lyo-Enzyme | 1 | - |
Lyo-Paʻa | 8 | - |
Hui Pūmua (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
Hoʻohui Probe (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
Palapala RNA | 5 | - |
DEPC H2O | A hiki i 25 | - |
2. Hoʻoponopono Paʻa Paʻikala
1) Kūkākūkā Paʻa Paʻa Paʻa
Ke kahua pane | Mahana | Manawa | Kaapuni | |
1 | Hoʻihoʻi i ka palapala | 50°Ca | 10 min | 1 |
2 | Denaturation mua | 95°C | 5 min | 1 |
3 | Pane hoʻonui | 95°C | 15 sec | 45 pōʻaiapuni |
60°Cb | 30 secc |
2) Kūkākūkā Kaʻa Paikikala wikiwiki
| Ke kahua pane | Mahana | Manawa | Kaapuni |
1 | Hoʻihoʻi i ka palapala | 50°Ca | 2min | 1 |
2 | Denaturation mua | 95°C | 2sec | 1 |
3 | Pane hoʻonui | 95°C | 1 sec |
45 pōʻaiapuni |
60°Cb | 13 secc |
Nānā:
a) Huli palapala kākau: Hiki i ka mahana ke koho 42°C a i ole 50°C no 10-15 mau minuke.
b) Pane hoʻonui: Hoʻololi ʻia ka mahana e like me ka waiwai Tm o nā kumu mua i hoʻolālā ʻia.
c)ʻO ka fluorescence hōʻailona loaa: E ʻoluʻolu e hoʻonoho i ke kaʻina hana hoʻokolohua e like me nā koi o kamanual mea kani.
ʻIkepili ʻenehana / kikoʻī
Hoomaka Wela | Hoʻomaka wela i kūkulu ʻia |
ʻAno ʻike | ʻO ka ʻike maka mua |
ʻano PCR | Hoʻokahi ʻanuʻu RT-qPCR |
ʻAno hāpana | RNA |
Nā memo
1. No ka noiʻi wale nō kēia huahana.
2. E ʻoluʻolu e ʻaʻahu i ka PPE pono, e like me ka lole lab a me nā mīkina lima, e hōʻoia i kou olakino a palekana!